病毒與自體免疫疾病,在近年來的研究已被證實具有相當密切之關係。最近，許多研究報告指出人類微小病毒B19(B19)感染相似於全身性紅斑性狼瘡(SLE)或類風濕關節炎(RA)等，此外B19感染病人也有自體抗體表現增加的情形。過去我們實驗室的一些研究發現B19感染會造成自體抗體的產生及與自體免疫疾病有密切之關係。此外，也發現B19感染對於非紅血球系細胞(COS-7)也會產生細胞凋亡(主要是經由粒線體路徑)的情形及促進IL6分泌。但至目前為止，人類微小病毒B19在這些自體免疫疾病發展的角色仍不清楚。人類微小病毒B19是屬於小病毒(Parvoviridae)且無套膜之單股DNA 病毒，基因約為5600 bases。主要由兩個殼體蛋白(結構蛋白)〔VP1 (781 amino acids [aa]) 和VP2 (554 aa)〕和非結構蛋白NS-1 所組成。這兩個殼體蛋白除了VP1 比VP2在N端多了227 amino acids外，而這多出的序列已被命名為結構蛋白獨立區域[VP1 uniqueregion (VP1u)]。先前許多文獻研究指出，大部分的中和性抗原決定位是位在VP1u。在最近更有文獻指出在VP1u 上有phospholipase A2 之motif，並推論這區域和自體免疫的產生有著密切的關係。因此，我們為了了解人類微小病毒B19感染和自體免疫疾病之間的關係，特別是B19結構蛋白的VP1u 蛋白在B19感染和自體免疫之間的角色，我們將B19之結構蛋白VP1u (wild type)和VP1u-D175A (mutant)構築到pET32a 表達載體，純化VP1u 和VP1u-D175A 蛋白質，和B19感染病人血清作用並分析相關抗原抗體的表現。另外我們也將利用純化後的專一性VP1u (wild type)和VP1u-D175A (mutant)免疫兔子並得到血清。結果發現在112 位的B19感染病人中屬於B19診斷型式為DNA+/IgM+/IgG+的病人血清有57%的血清樣本也會和牛心脂抗原(CL)及β2GPI 反應，而這些病人血清在經過VP1u 抗原先作用後，再和牛心脂抗原(CL)及β2GPI 反應，結果發現確實也抑制了血清和牛心脂抗原(CL)及β2GPI 的結合反應。這些結果讓我們更進一步了解到在急性感染B19的病人所產生的抗牛心脂和抗β2GPI 蛋白質自體抗體和VP1u 是有關係的。而這些線索可提供對於人類微小病毒B19-VP1u 在人類微小病毒B19感染時病人抗磷脂質抗體產生上扮演重要的的角色。
exception for an additional 227 amino acids at its amino terminus (VP1 unique region, VP1u). According to homology studies, a phospholipase A2 motif is present in the amino acid sequence of the VP1 unique region. A very recent study shows the association of parvovirus B19 infection with the presence of anti-phospholipid antibodies. Thus, these observations encouraged us to study more about the possible link between B19 infection and autoimmune diseases. Sera from 102 clinically suspected cases of B19 infection were analyzed. Sera from patients with the diagnostic pattern DNA+/IgM+/IgG+ had a high frequency (57%) for recognition of CL and beta2GPI. Furthermore, adsorption experiments were performed by adding purified B19-VP1u, which partially suppressed the reactivity of anti-B19VP1u to CL and beta2GPI. Thus, serum from patients with acute B19 infection have a high frequency in recognition of CL and beta2GPI, and the phospholipase domain observed in the B19-VP1u may have contributed to the production of aPL. These findings may provide a clue for understanding the roles of B19-VP1u in B19 infection and aPL production.
